重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification, RPA)是一种在恒温(37–42°C)条件下进行的核酸扩增技术,无需热循环仪。本试剂盒依靠重组酶(UvsX)、单链DNA结合蛋白(GP32)、链置换DNA聚合酶协同,恒温条件实现核酸扩增。仅需设计特异性引物,加入模板后于37°C孵育10–40分钟即可获得扩增产物,产物可通过电泳、实时荧光(配合Exo探针)或侧向层析试纸条(LFS)进行检测。
恒温反应:37–42°C即可反应,仅需简单加热块或水浴,无需PCR仪;
极速扩增:10–40分钟即可完成扩增,远快于常规PCR ;
便捷快速:可搭配胶体金试纸实现肉眼可视化判读,设备依赖度极低;
多重兼容:通过不同标记引物可实现多靶标同时检测。
| 货号 | 组分 | 规格 | 数量 |
| B24011A | T4 UvsX | 50 μL | 1 |
| B24021A | T4 UvsY | 50 μL | 1 |
| B24031A | Bsu DNA Polymerase | 50 μL | 1 |
| B24041A | T4 Gene 32 Protein | 50 μL | 1 |
| B24051A | 2×RPA Buffer | 1 mL | 1 |
| B24061A | MgCl2, 280 mM each | 100 μL | 1 |
| B24071A | dNTP Mix, 10mM each | 50 μL | 1 |
-20℃保存,≤0℃运输
等温文库扩增(替代PCR用于NGS文库构建)、现场快速检测(动物疫病、植物病原、食品安全)、无需 PCR 仪的床边快速诊断、与CRISPR-Cas12/13结合的高特异性检测(SHERLOCK/DETECTR平台)。
出现阴性对照扩增出目的条带。
1. 污染:操作不规范、样本浓度过高或未分区导致气溶胶污染。需分区实验,紫外灯灭菌,使用核酸清除剂清洁。 2. 试剂失效:引物/探针设计不良或降解,需重新验证探针特异性。 3. 模板问题:RNA模板三级结构抑制逆转录酶,建议先加模板再激活剂,或分别加入管内壁两侧后离心混匀。
扩增曲线存在异常,存在非特异性条带。
1. 二次起峰:荧光实验中聚合酶与核酸外切酶竞争导致,不影响结果判读。 2. 基线过高:荧光型体系添加激活剂过早,引物/探针被核酸酶降解。
