本产品为高GC含量模板专用的2×超高保真PCR预混液,预混体系中包含经分子酶学改造的新一代超高保真DNAPolymerase、dNTPs、GC 增强剂和优化的反应缓冲液,使用时仅需加入模板DNA、引物与去离子水即可启动扩增反应。
其中核心的DNA聚合酶保真度可达Taq DNA聚合酶的120倍,兼具极高的扩增效率与广泛的模板适应性;该酶拥有3′→5′外切酶校正活性,扩增产物为平末端,可稳定、高效扩增GC含量≥70%且长度不限的高难度模板。预混液中添加的独特稳定剂,可保障产品在经历25次反复冻融后,扩增性能仍无明显波动,使用稳定性优异。
高GC PCR预混液(2×)专用GC缓冲体系:优化离子强度与添加剂配比,有效打开高GC模板的二级结构;
高成功率:对GC含量高达75%的模板仍可高效扩增;
减少非特异性:增强型缓冲液,显著降低引物二聚体及非特异条带;
兼容性强:适用于常规PCR仪及快速PCR程序。
| 货号 | 组分 | 规格 | 数量 |
| B02051A | 高GC PCR预混液(2×) | 1 mL | 1 |
| B02051A | 高GC PCR预混液(2×) | 1 mL | 5 |
-20℃保存,尽量避免反复冻融。
高GC DNA片段的扩增。
当我用凝胶电泳检测时,我的寡核苷酸没有显示出正确长度。这是为什么?
寡核苷酸应该在含有7M尿素的聚丙烯酰胺凝胶上检测,并且应该与50%的甲酰胺溶液一起上样以避免压缩和形成二级结构。长度相同但是组成不同的寡核苷酸可以产生不同的电泳结果。dC的迁移最快,其次是dA、dT,最慢的是dG。带有核糖核酸的寡核苷酸容易产生模糊的电泳条带,并且通常存在二级结构问题。
所使用的引物刚开始时可以用来做PCR的,但是随着时间的推移它失效了。这是为什么?
在进行PCR之前应将引物按单次使用的量分装。将分装的引物在94℃下加热1分钟。在加入PCR反应体系前快速在冰上冷却引物。有些引物可能会自己退火或者自己蜷缩起来。