安全性高,无致突变性:GelRed独特的油性和大分子量特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内,从根本上降低了操作风险。艾姆斯氏试验(Ames test)结果证实,GelRed在远高于凝胶染色使用的工作浓度下均未表现出细胞毒性或诱变性。其水溶染色剂通过美国环保局安全认定,废弃物无需特殊处理可直接倒入下水道。
灵敏度高:GelRed的检测灵敏度比EB高8–10倍,尤其对小分子量DNA的检测具有极高灵敏度。可清晰检测低至1 ng的DNA条带。适用于各种大小片段的电泳染色,对核酸迁移的影响小于SYBR Green I,确保条带位置准确可靠。
稳定性好:本品耐受性强,可在微波炉或其他加热方式下直接加入高温琼脂糖凝胶溶液中,在室温酸性或碱性缓冲液中均保持高度稳定,耐光性能优异,室温避光条件下可长期保存。
操作简便,兼容性强:GelRed与EB用法完全一致,支持预制胶染色(胶染法)和电泳后染色(泡染法)两种方式,均无需脱色。与标准凝胶成像系统完美兼容,可使用标准的EB滤光片或SYBR滤光片观察。染色后的核酸产物不影响下游实验,可顺利用于凝胶纯化、限制性酶切、测序及克隆等后续操作。
| 货号 | 组分 | 规格 | 数量 |
| B60011A | GelRed(10000×) | 0.2 mL | 1 |
15 ~ 25℃避光保存。
GelRed与溴化乙锭(EB)有何区别?
EB和GelRed均可用于核酸电泳染色,但EB为小分子染料(分子量约394),能穿透细胞膜进入细胞,具有强致突变性和致癌性。GelRed为油性大分子染料(分子量约1400),不能穿透细胞膜进入活细胞,艾姆斯氏试验证实其在凝胶染色浓度下无致突变性。两者光谱特性几乎一致,因此用GelRed替代EB时无需更换成像系统。
GelRed有哪几种染色方法?如何选择?
GelRed支持两种染色方式: 胶染法(预制凝胶染色) :制胶时将GelRed直接加入熔化的琼脂糖中(如每50 mL凝胶加入5 μL 10000×储存液),混匀后制胶,电泳后直接观察。该方法操作简单、染料用量少、更为经济。但GelRed对DNA迁移有一定影响,大量上样时可能出现条带迁移异常。 泡染法(电泳后染色) :电泳结束后将凝胶浸泡于稀释后的GelRed溶液中(如用0.1M NaCl水溶液按3300:1稀释10000×浓缩液,制成3×工作液),室温震荡染色30分钟左右,无需脱色即可观察。该方法灵敏度更高,能排除染料对DNA迁移的干扰,但染料用量较多,染色液可重复使用2–3次。 建议:常规实验优先选用胶染法;对条带分离度要求较高或上样量较大时,推荐使用泡染法。
GelRed适用于聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)吗?
GelRed适用于聚丙烯酰胺凝胶电泳中DNA/RNA的染色,但需采用泡染法。有资料指出PAGE胶的高浓度丙烯酰胺可能影响GelRed的嵌入效率,建议根据具体实验条件进行预试验确认染色效果。
GelRed可以用于单链DNA或RNA染色吗?
可以。GelRed可用于单链DNA和RNA的染色。但GelRed与单链核酸结合后的荧光信号约为双链DNA的一半。对于单链核酸的染色灵敏度,GelRed比GelGreen敏感约5倍。
使用胶染法时出现条带迁移异常或“微笑”条带,如何改善?
可能原因及解决方案如下: DNA上样量过大:推荐上样量为50–200 ng/泳道,对于未知浓度样品可尝试减少至常用量的1/2或1/3。 GelRed浓度过高:尝试使用0.5×工作浓度替代1×。 凝胶浓度不适宜:高分子量DNA建议使用低百分比琼脂糖凝胶。 电泳缓冲液不匹配:TBE缓冲液通常比TAE缓冲液分离效果更好。 改用泡染法:如上述调整无效,建议改用泡染法以避免染料对DNA迁移的干扰。
GelRed预制凝胶可以提前制备保存吗?
可以。GelRed染料在琼脂糖凝胶中稳定,可提前制备预制凝胶并在4℃避光保存备用。但电泳后的凝胶不建议重复使用,因为连续电泳会降低染色强度。
