| 货号 | 组分 | 规格 | 数量 |
| B16041A | 10×DNA Loading Buffer | 1 mL | 5 |
2-8℃。
10×DNA Loading Buffer 是否可以用于 RNA 样本的电泳?
可以。但使用前须确保 10×DNA Loading Buffer 未被 RNase 污染,建议使用无 RNase 的枪头吸取。如样本为 RNA,更推荐使用专用的 RNA Loading Buffer,以避免 RNA 降解风险。
已加入 10×DNA Loading Buffer 的 PCR 产物,能否直接进行后续酶切反应?
可以。Loading Buffer 中的染料不会影响限制性内切酶的活性,已加入 Loading Buffer 的 PCR 产物可直接进行酶切反应。
10×DNA Loading Buffer 和 6×DNA Loading Buffer 有什么区别?
两者的核心区别在于浓度和工作稀释比例。10×浓缩倍数是6×的约1.67倍,使用时需按不同比例稀释至终浓度1×。此外,部分品牌的10×配方中含有SDS(十二烷基硫酸钠),而6×通常不含。含SDS的10×Loading Buffer可使酶类(如Taq酶)变性,若用于PCR产物电泳,可能导致条带弥散。建议根据实验需求选择合适产品。
溴酚蓝和二甲苯青FF分别指示多大的 DNA 片段?
在1%琼脂糖凝胶中,溴酚蓝的迁移率约相当于300 bp的DNA片段;二甲苯青FF的迁移率约相当于4000 bp(4 kb)的DNA片段。两种染料可帮助实时判断电泳进程,当目标条带跑至合适位置时及时终止电泳。
样品加入 10×DNA Loading Buffer 后,在上样时飘出加样孔,是什么原因?
可能原因包括: 稀释比例不正确:未按9:1的比例将样品与10×Loading Buffer混合,导致终浓度不足1×,比重不够。 混匀不充分:样品与Loading Buffer未充分混匀,比重不均匀。 加样操作不当:枪头未伸入加样孔液面以下,或打样速度过快导致样品冲出。 样品中残留乙醇:如为质粒抽提产物,洗脱前可能有乙醇残留,建议充分离心或抽真空去除。
电泳后条带出现弥散或模糊,是否与 Loading Buffer 有关?
可能有关。部分10×DNA Loading Buffer配方中含有SDS,SDS会使Taq酶等蛋白质变性,与PCR产物混合后可能导致条带弥散。此外,条带弥散也可能由以下原因引起: DNA样品降解(避免核酸酶污染) 上样量过大 电泳缓冲液陈旧,缓冲能力下降 电泳电压过高(建议不超过20 V/cm)或温度过高
