超热稳定单链结合蛋白(ET SSB)是提取于极端嗜热微生物的高性能单链 DNA 结合蛋白。蛋白在溶液中以单体形式存在,自带专属 OB-fold 核酸结合结构域,仅在结合单链 DNA 时才形成聚合结构。
本蛋白具备序列非特异性单链 DNA 结合能力,可特异性结合单链 DNA,不结合双链 DNA 与 RNA。能有效保护单链 DNA 不被核酸酶降解,同时抑制 DNA 自身折叠形成二级结构,松解 DNA 螺旋结构,辅助 DNA 聚合酶高效结合模板,显著提升核酸扩增、测序实验的成功率。
产品拥有极致耐高温特性,95℃高温持续孵育 60 分钟仍可保持完整酶活,热稳定性能远超常规大肠杆菌 SSB 蛋白,可直接耐受 PCR 全程高温变性步骤,无需中途补加试剂。
1. 极致耐高温,适配高温实验
常规大肠杆菌 SSB 蛋白 65℃即大幅失活,本产品 95℃长时间高温处理仍活性完整,可全程适配 PCR 高温循环体系,无需二次补加,实验操作更简便。
2. 优化模板结构,大幅提升扩增效果
可稳定保护单链 DNA 模板,杜绝核酸酶降解与发夹、茎环等二级结构生成,有效解决复杂模板扩增困难、非特异性扩增、扩增产量低等问题。
3. 通用无偏好结合,适配性广
采用非序列依赖型结合模式,可适配各类不同模板序列,兼容 PCR、qPCR、RT-PCR、DNA 测序等多种主流分子实验体系。
4. 超高纯度,低杂质干扰
经多重纯化工艺处理,蛋白纯度≥95%,宿主 DNA 残留极低,无外切酶、切口酶、RNase 等杂酶污染,实验背景干净,数据重复性极高。
5. 缓冲体系兼容性强
适配市面绝大多数 DNA 聚合酶反应缓冲液,可直接添加至各类核酸反应体系,无需调整体系配比,即用即配、兼容性拉满。
6. 专属优化多重 PCR 与复杂模板
针对高 GC、重复序列、易折叠复杂模板,以及多重 PCR 多引物体系,可显著提升扩增特异性与产物产量,降低非特异性条带。
| 货号 | 组分 | 浓度 | 规格 | 数量 |
| B58011A | 超热稳定单链结合蛋白(ET SSB) | 500 µg/ml | 50 μg | 1 |
使用说明:本产品适配各类聚合酶缓冲体系,通用参考用量:每 50 μL 反应体系添加 200 ng ET SSB 即可达到最优实验效果。
缓冲液配方:10 mM Tris-HCl、100 mM KCl、0.1 mM EDTA、50% Glycerol,pH 7.4(25℃)
1. 长期保存:推荐 -25℃ ~ -15℃ 密封冷冻保存,稳定留存蛋白活性;
2. 短期保存:一年内短期使用可存放于 4℃环境;
3. 保存禁忌:严禁反复冻融,建议收到产品后按需分装储存;冻干粉版本可在 4℃干燥密封条件下长期保存。
1. 核酸扩增优化:显著提升普通 PCR、多重 PCR、qPCR、RT-PCR 的扩增产量与特异性,解决复杂模板扩增难题;
2. DNA 测序实验:稳定单链 DNA 模板,消除二级结构干扰,提升高复杂序列的测序精准度与读长质量;
3. 核酸样本保护:全程保护单链 DNA,避免核酸酶降解,保障模板完整性;
4. 基因编辑辅助实验:增强 RecA 蛋白的单链 DNA 结合能力与链置换效率,优化同源重组相关实验;
5. 高通量核酸实验:适配各类高温、长时间、高难度分子生物学反应体系,适合高通量科研实验开发。
ET SSB与常规E. coli SSB有何区别?
两者均具有相似的ssDNA结合特性,但ET SSB因含有单个OB-fold结构域及一个灵活的C端尾部结构,具有显著更强的热稳定性。E. coli SSB在高于65℃时即失去大部分活性,而ET SSB经95℃孵育60分钟后仍保持完全活性。此外,ET SSB在溶液中主要以单体形式存在,结合ssDNA后才形成多聚体。
ET SSB能否结合RNA或双链DNA?
不能。ET SSB是一种不依赖于特异性序列的ssDNA结合蛋白,特异性结合单链DNA,不能结合RNA或双链DNA。
ET SSB应如何保存?
建议于-25℃~-15℃保存。避免反复冻融,建议分装保存以保持蛋白活性。
ET SSB在PCR反应中应如何使用?
ET SSB可作为PCR添加剂直接加入反应体系中。推荐在PCR反应前将ET SSB与模板、引物及缓冲液混合后再进行热循环。由于ET SSB具有极高的热稳定性,可耐受PCR全过程的高温变性步骤而无需在每轮循环后补加。具体用量需根据实验体系优化,建议从较低浓度开始进行梯度测试。
ET SSB能否改善复杂模板的PCR扩增?
可以。研究表明,SSB通过稳定ssDNA、防止其形成二级结构,并直接或间接作用于聚合酶以增加链置换活性和对引物模板的亲和力,从而有效改善富含GC等复杂模板的PCR性能。ET SSB同样适用于多重PCR体系的优化。
本产品是否有核酸酶残留?
本品经严格质控,无核酸外切酶、切口酶及RNase残留,确保不会对核酸模板或扩增产物造成降解,保障实验结果的可靠性。
