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无缝克隆

PLUS Seamless Cloning Kit

增强型无缝克隆试剂盒

增强型无缝克隆试剂盒
增强型无缝克隆试剂盒
增强型无缝克隆试剂盒
增强型无缝克隆试剂盒
增强型无缝克隆试剂盒
增强型无缝克隆试剂盒

货号:A03021A

价格: ¥460

规格:

  • 20 rxns
  • 40 rxns
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产品简介

本产品在无缝克隆试剂盒基础上优化配方,添加了稳定剂,提高了长片段和多片段的无缝克隆效率。

产品优势

多片段、长片段高效连接:对于多片段无缝克隆,可连接至多10个总长8kbp或4个总长10kbp的DNA片段;对于长片段无缝克隆,可连接长达10kbp单一DNA片段。

产品稳定性提高:反复冻融20次仍可保留约50%活性。

规格组分

货号组分规格数量
B03021APLUS Seamless Cloning Mix(2×)100 μL1
B03022APLUS Seamless Cloning Mix(2×)200 μL1

储存条件

-20℃保存,≤0℃运输。

产品应用

本品可通过单次反应将至多10个总长8kbp或4个总长10kbp的DNA片段通过同源重组形式与线性化载体连接。

如何选择无缝克隆试剂盒和增强型无缝克隆试剂盒?

无缝克隆试剂盒满足多数场景下的无缝克隆需求,对于多片段可实现至多4个片段且总长4000bp的无缝克隆。 若使用的片段数量>4,或单片段长度>4000bp,推荐使用增强型无缝克隆试剂盒。

使用增强型无缝克隆试剂盒时,对插入的片段数量和大小有限制吗?

片段总数≤8且总长≤10000bp即可,对于单独的片段无大小限制。

进行多片段无缝克隆时,出现大量载体自环化或未完全重组的假阳性转化子,如何解决?

对于多片段无缝克隆,可以适当延长片段之间的同源臂(如35bp-50bp),提高正确重组率。另外,应确保使用的载体完全线性化。

进行长片段无缝克隆时,出现大量假阳性转化子,如何解决?

不论单片段无缝克隆或多片段无缝克隆,若单一片段的长度≥4000bp,应考虑降低无缝克隆反应体系中的核酸总量至100ng以下。

多片段无缝克隆时,转化子数量较少

转化子数量与插入片段数量和总长度成反比,可考虑搭配Zymagen5α感受态细胞进行转化试验,可显著提高转化子数量。

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