本产品是一种用于SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)蛋白样品制备的2×浓缩型上样缓冲液。配方中含示踪染料溴酚蓝,可用于实时监测电泳进程。使用时与蛋白样品混合至1×工作浓度,95℃以上水浴10min即可完成对样品变性处理,在凝胶电泳中可实现良好的组分分离,配合考马斯亮蓝染色或银染等显色方法,蛋白条带可清晰显影。
| 货号 | 组分 | 规格 | 数量 |
| B16031A | SDS-PAGE Loading Buffer(2×) | 1 mL | 5 |
-20℃。
上样缓冲液出现沉淀是什么原因?如何处理?
SDS在低温下容易析出形成沉淀。使用前将缓冲液在室温或不超过37℃的水浴中加热溶解,直至沉淀完全消失,然后立即室温存放。避免长时间置于高温环境中。
使用比例和加热条件是什么?
按蛋白样品:上样缓冲液 = 4:1的比例混合(即每4 μL蛋白样品加入1 μL 5×上样缓冲液),充分混匀。于100℃沸水浴加热3–5分钟使蛋白充分变性。建议95℃加热5分钟,温度过高(如100℃)或时间过长(如超过15分钟)可能导致蛋白降解或指示剂颜色异常。
加热后样品仍然粘稠怎么办?
如细胞或组织用量较大、基因组DNA含量较高,煮沸后可能仍较粘稠或有半透明凝胶状物。可延长煮沸时间5–10分钟,或加入适量稀释成1×的上样缓冲液后再煮沸3–5分钟,使基因组DNA断裂、蛋白充分释放。也可使用超声或1 mL注射器反复抽吸打断基因组DNA。
上样缓冲液是否适用于非变性PAGE?
不适用。本产品含有SDS变性剂,仅适用于SDS-PAGE变性凝胶电泳,不适用于非变性凝胶电泳(Native-PAGE)。
5×上样缓冲液与2×上样缓冲液有何不同?
主要区别在于浓缩倍数和稀释比例。5×需按1:4稀释至1×使用;2×则按1:1稀释。两者成分和作用原理相同,可根据实验习惯和样品量选择。
