定点突变试剂盒是一种可在任意类型的质粒 DNA 中引入点突变、插入或缺失的试剂盒。本品可快速完成质粒DNA的点突变,多个邻近密码子的突变,单个或多个邻近密码子的缺失或插入突变。
本试剂盒提供了DH5α甘油菌,可用于感受态细胞的制备。
模板用量低:指数级扩增
操作简便:无需特殊载体、限制性位点或靶标质粒甲基化状态,无需单独步骤破坏起始模板
适用范围广:扩增长度可达10kb
| 货号 | 组分 | 规格 | 数量 |
| B29011A | Super HiFi PCR Master Mix(2×) | 125 μL | 1 |
| B29021A | Dpn I | 10 μL | 1 |
| B29031A | DH5α甘油菌 | 200 μL | 1 |
| B29041A | 重组酶 | 50 μL | 1 |
-20℃保存,≤0℃运输。
本品可在任意类型的质粒 DNA 中引入点突变、插入或缺失,完成质粒DNA的定点突变。
该试剂盒是否支持多点突变?
可以应用于多点突变,但对于突变位点数≥4时成功率下降。
是否支持50bp或更长位点的突变?
突变位点取决于引物设计,但对于>50bp的碱基改变,在酶切位点合适的前提下建议尝试无缝克隆。
引物设计有哪些需要注意的地方?
引物总长度一般为25–45 bp,其中突变位点两侧的同源序列各占15–20 bp,确保退火特异性;此外,突变碱基应尽量设计在引物的中间区域。
