该产品相较定点突变试剂盒优化了无缝克隆缓冲体系,是一种可在任意类型的质粒 DNA 中引入点突变、插入或缺失的试剂盒,经优化的体系显著提高了多点突变正确率,亦可用于单一位点突变。
本试剂盒提供了DH5α甘油菌,可用于感受态细胞的制备。
模板用量低:指数级扩增
操作简便:无需特殊载体、限制性位点或靶标质粒甲基化状态,无需单独步骤破坏起始模板
适用范围广:适用于多点突变和单一位点突变,扩增长度可达10kb
| 货号 | 组分 | 规格 | 数量 |
| B63011A | Super HiFi PCR Master Mix(2×) | 125 μL | 1 |
| B63021A | Dpn I | 10 μL | 1 |
| B63031A | DH5α甘油菌 | 200 μL | 1 |
| B63041A | 重组酶PLUS | 50 μL | 1 |
-20℃保存,≤0℃运输。
本品可在任意类型的质粒 DNA 中引入点突变、插入或缺失,完成质粒DNA的多点突变和单一点突变。
如何选择定点突变试剂盒和多点突变试剂盒?
多点突变试剂盒中的PCR Mix和重组酶经过优化,对于突变位点≥4,以及高GC片段、长片段(≥10k bp)的突变成功率更高。若突变位点较少且片段长度适中,选择定点突变试剂盒即可。
如何提高多点突变的成功率?
成功率会受以下因素影响: ·突变位点间的距离(相距较远的位点效率更高); ·突变类型(碱基替换效率优于插入/缺失); ·质粒大小和序列复杂度; 建议在正式实验前设置小量预实验评估效率。
